7月20日
，，，，飞马星空教育疫苗副总裁兼首席研究官张凡、、
、、飞马星空教育丽凡达总经理彭育才等在《npj Vaccines》上发表了题为“Safety and efficacy assessment of an mRNA rabies vaccine in dogs, rodents, and cynomolgus macaques”的研究论文。。进一步研究了mRNA狂犬疫苗LVRNA001在犬和小鼠中的保护效力，，，，并使用不同剂量在食蟹猴、、小鼠和大鼠中进行了系统的安全性评估。。数据表明
：LVRNA001仅需两针，，，，即可提供100%安全有效的免疫保护。。。这为推进人用狂犬病mRNA疫苗的下一阶段研究奠定了坚实基础。。。

仅需两针，，，提供100%保护率

在本研究中，，，团队首先测试了LVRNA001在犬体内的保护效力
。
。。在感染致死剂量的RABV之前
，，犬用10 μg或50 μg LVRNA001免疫接种2次（D0-7免疫方案）
。。对照组犬接种3次（D0-7-21免疫方案）人用剂量的灭活疫苗或PBS。。。
。所有犬在第35天接受50倍LD50（半数致死量）的街毒BD06毒株攻毒（图1a）。。。
。

 
图1：犬模型LVRNA001暴露前和暴露后免疫保护效果

结果显示，，高剂量和低剂量LVRNA001及灭活疫苗组的存活率为100%，，，而PBS组的存活率为0%（图1b）
。
。所有接种疫苗组在D7
、
、、D9、
、D11
、
、、D35和D125都可检测到高水平的中和抗体
，，均高于WHO建议的中和抗体保护阈值0.5 IU/mL（图1c）
。。。。最为重要的是
，，，LVRNA001疫苗接种组在D125上保持了比灭活疫苗组更高的中和抗体滴度（图1c），，，表明与灭活疫苗相比，，LVRNA001疫苗接种会产生更强更持久的免疫保护反应。。
。

接下来继续评估了狂犬病毒暴露后的疫苗效力，
，，四组犬均先通过肌肉注射感染50倍LD50毒力RABV-BD06毒株。。病毒感染6小时后，，接种LVRNA001（10或 50 μg，，D0-7），，
，，另外接种五针法人用剂量的灭活疫苗（D0-3-7-14-28）作为阳性对照，
，，PBS作为阴性对照（图1d）。。接种后90天存活率数据显示，
，接种两次10或50 μg LVRNA001和五剂灭活疫苗的犬存活率为100%，，，，而所有接受PBS的犬都死亡（图1e）。。。。暴露后接种疫苗三个月后
，，，，与灭活疫苗组相比，，mRNA高/低剂量组检测到的中和抗体水平相对较高（图1f）。
。。

在小鼠体内，，与按照五针法接种的灭活疫苗相比，，，，接种两剂的LVRNA001诱导的中和抗体水平明显更高（图2c）
。
。
。值得关注的是
，，，LVRNA001高剂量组可在首次免疫后第5天使小鼠血清阳转率达到100%，，，并可使小鼠更快产生高于0.5 IU/mL的保护性中和抗体（图2c）
。。。这表明LVRNA001可以刺激小鼠以比灭活疫苗更快的速度产生更高水平的中和抗体，
，，，对于严重的暴露后处置尤为重要
，，可在狂犬病病毒到达神经中枢之前更有效的截杀病毒。。。

图2
：小鼠模型接种方案探索

随后进行的小鼠暴露前免疫保护效力结果表明
，，注射1剂LVRNA001就可对攻毒小鼠提供100%的保护。
。。暴露后以不同免疫程序（D0-7或D0-14）注射2剂的高剂量LVRNA001可为攻毒小鼠提供理想的保护效果，
，
，，对中国七个种群狂犬病病毒代表株攻毒（中国I-VII株
：SC16、、
、GD1
、
、NM3、
、QH2、
、、、LY、、YN3和XZ17
。。。
。为了能区分不同疫苗、
、不同接种程序的保护率
，，，我们设置的攻毒剂量远高于常规攻毒剂量的要求，，以免出现保护率都是100%的情况）的平均保护率分别达到了85.71%和88.57%。。。与之相比，，
，五针法灭活疫苗高剂量组的保护率仅为52.8%（图3）。。
。

 

图3. 小鼠模型LVRNA001暴露前和暴露后免疫保护效果

LVRNA001可在食蟹猴中引起强大的免疫原性反应，，
，同时保持相对安全的特征

据论文，，，本项研究确认了不同剂量的LVRNA001对犬和小鼠致死剂量RABV的保护效果，
，并分别评估了LVRNA001在食蟹猴和大鼠中重复剂量引起慢性毒性和生殖毒性的安全性。。。研究表明，，
，LVRNA001可以在食蟹猴中引起强大的免疫原性反应，，，同时保持相对安全的特征。
。。。

 

图. LVRNA001在食蟹猴中具有高度免疫原性

安全性评估是研究性新药（IND）申请的强制性要求
，，，多项研究结果表明，，LVRNA001在对小鼠的急性毒性研究中，，，单次给药LVRNA001（10或50 μg）不会引起明显的毒性反应。
。对食蟹猴的重复给药毒性研究也表明，，，，低剂量和高剂量都具有良好的耐受性。
。。。

该疫苗在食蟹猴的AST
、、、、ALT和ALP水平没有引起显著变化，，表明重复给药LVRNA001不会改变肝细胞的功能和代谢。
。。然而，
，重复给药LNP和LNP-mRNA在5周的重复给药期间会引起炎症，，，导致FIB、
、CRP和A/G比值等标志物发生显著变化。。。FIB和CRP作为炎症标志物通常因炎症而升高。。。
。据报道，，，CRP是急性期反应的一部分，，，其中许多血浆蛋白合成上调，，而少量血浆蛋白合成（尤其是白蛋白）下调。。这些变化在恢复4周后消失
，，，，提示仅在注射部位存在短暂的注射相关炎症反应。。。

T细胞免疫反应，，特别是Th1偏向的免疫反应，，对于从中枢神经系统中消除RABV病毒很重要。。对食蟹猴的研究表明
，
，，
，T细胞反应与IFN-γ分泌细胞的产生呈Th1极化
，，
，，表明对食蟹猴反复给药LVRNA001不会引起全身毒性，
，，，同时产生针对狂犬病病毒的强烈特异性T细胞免疫反应。。。。同时
，，，大鼠生殖毒性研究表明，，LVRNA001给药不会影响怀孕的大鼠或其子代
，，也不会产生生殖或发育毒性。。

图. 食蟹猴模型生化评估和淋巴细胞亚群检测

总之
，
，，，mRNA狂犬疫苗LVRNA001可以更快产生更高水平的中和抗体并提供体内保护
，，，表明LVRNA001是狂犬病的有利候选疫苗。。。